Techniki biologii molekularnej: lańcuchowa reakcja polimerazy (PCR)

Reakcja lańcuchowa polimerazy (PCR) ma jako glówne zastosowanie możliwośc amplifikacji odcinka DNA, wytwarzając miliony kopii wybranego odcinka. Klonowanie genów ma na celu wprowadzenie wybranego genu do bakterii, które są identyczne ze sobą, a technika ta wymaga obecności wektora klonującego zdolnego do amplifikacji sklonowanego fragmentu DNA. Gen E wirusa dengi (DENV) jest najczęściej wykorzystywany w badaniach molekularnych ze względu na znaczenie bialka E. Celem tego badania jest ustalenie technik amplifikacji genu E wirusów DENV-2 i DENV-4. Cząsteczka DNA zostala uzyskana z FIOCRUZ w Recife; startery zostaly wybrane tak, aby zawieraly gen E. Fragmenty zostaly rozdzielone za pomocą elektroforezy w żelu agarozowym. Amplifikacja PCR zostala zadowalająco ustalona dla genu E. Po ustaleniu, techniki te są niezbędne na etapach uzyskiwania rekombinowanego DNA w procesie klonowania i ekspresji bialka E dengi.